血脑屏障实验你需要的是做什么？

      19世纪末，保罗·埃尔利希在一个实验中发现了这个屏障。保罗·埃尔利希当时是位微生物学家，他当时正研究染色技术，目的在于使微形生物结构能被看见。这些染色剂中，尤其苯胺在当时，常被使用。当将苯胺注入生物体内的时候，这个生物的所有器官都会被染色，唯独脑细胞没有被染色。当时，埃尔利希将此现象归咎为脑细胞没有吸收足够的染色剂。

      许多年后，埃尔利希的学生，Edwin Goldmann将苯胺直接注入脊髓中，这时脑细胞被染上颜色，但是身体其他地方却没有被染色。这个现象，明显展现出脑和身体其他组织有一层屏障，当时由于找不到“屏障”，因此血管被认为是那层屏障。直到1960年代，扫描式电子显微镜被用于医学研究的时候，这层神秘的屏障才被发现。

      脑血管障壁几乎不让任何物质通过，除了氧气、二氧化碳和血糖，大部分的药物和蛋白质由于分子结构过大，一般无法通过。

       有关实验数据大约25%的人携带APOE基因的APOE4变体，这使得他们患老年痴呆症的风险大大增加。几乎所有阿尔茨海默病患者，甚至一些没有阿尔茨海默病的老年人，都患有脑淀粉样血管病（cerebral amyloid angiopathy, CAA）。这种情况下，淀粉样蛋白沉积在血管壁上，削弱了血脑屏障正确运输营养物质、清除废物和防止病原体和有害物质侵入的能力。

血脑屏障实验中，好的原代细胞成为了实验的关键，而细胞的取材和提取也成为了关键要素。一是细胞的纯度，第二是自己的操作手法，稍微不甚，则从头再来。

     由上海启达生物科技有限公司代理的cell Systems的原代细胞可以解决细胞取材和分离难的问题，购买原代细胞时一定要注意免疫荧光检测：是否有该细胞的主要的几个标志性的marker，如cell systems的脑内皮经CD31，VWF / Factor VIII，Uptake of Di-I-Ac-LDL免疫荧光检测；人脑周细胞经Desmin pericyte marker，PDGFR-b pericyte marker，NG2 pericyte marker，CD13 pericyte marker，a-SMA pericyte marker等周细胞主要的marker检测，因周细胞和内皮细胞取材层相邻，所以cell systems还进行了一系列的内皮细胞的标志物检测,纯度控制在95%以上。

细胞培养操作手法：

      1.培养基很重要：

购买哪个品牌的细胞请一定要用该品牌的配套培养基，这点真的很重要，因为细胞在提取的时候已经适应了该生长方式，贸然更改，细胞可能随时都会和你玩game over。

2. 消化手法很重要：

养细胞无非注意的就消化，消化的太久，消化完之后它就直接步入老年时代了，消化的时间不够时它就会像个婴儿般怎么也扶不起来，这里一坨那里一坨很是头疼，所以消化的时候不要把时间规定的太死，消化的时间是跟操作手法 ，胰酶，消化环境息息相关的，一定要以细胞的形态为准，细胞变圆，间隙开始变大，轻拍瓶壁细胞呈流沙状脱落时，即可终止消化。我们采用的cell Systems（ 4Z0-800）的消化套装，一站解决细胞所有消化问题。

      3.原代细胞你会选择冻存吗？

用不完的细胞，土豪一般都会选择扔掉，但是真的有必要吗？ 他们会回答，原代还是扔掉吧，因为复苏的也活不了几个，真的是这样吗？ 方法很重要，就看您怎么选，cell System的冻存液（4Z0-705）经31年的细胞分离和冻存经验的积累和更正，提供细胞冷冻/解冻循环的最佳环境培养，协助减少细胞损伤。备注：仅限于还可以传代的原代细胞哦，偶尔累了，冻存好细胞，给自己放个假，可能实验中打不开的心结就打开了。要是实验做完了，把没有实验的细胞冻存起来，留给师弟师妹，岂不美哉！