细胞培养“隐形杀手”：如何轻松应对支原体污染？

在细胞培养过程中，支原体和黑胶虫污染是两个常见的问题，它们会对细胞的生长、代谢和实验结果产生严重影响。今天，我们就来揭开它们的神秘面纱，并探讨如何应对这些麻烦制造者。

支原体是一种极其微小的原核生物，体积微小，能轻易穿透常规滤膜和抗生素屏障，成为细胞培养中最棘手的污染源之一。支原体污染的特征包括细胞增殖速度减缓、细胞形态异常（如拉丝、铺展等），且培养基通常不会浑浊。支原体感染后，细胞可能会出现生长迟缓、代谢速率改变，甚至导致细胞死亡，严重影响实验结果的可靠性。

支原体放大后：

支原体污染的特征:

1. 细胞增殖速度减缓、上清液依然清澈、大多数背景干净，但细胞形态可能出现异常，如拉丝、铺展等现象。

2. 晚期支原体污染会导致细胞培养基变酸性，但通常没有明显的迹象表明培养物受到污染。

3. 哺乳动物细胞培养物的特征：在污染的早期阶段，支原体通常不会引起培养基的pH值变化，也不会对哺乳动物细胞产生显著的毒性影响。支原体的生长主要与哺乳动物的细胞膜有关。在许多情况下，没有支原体污染的迹象，然而，支原体可引起细胞生长特性的变化、细胞代谢的抑制、核酸合成的破坏、染色体畸变、细胞膜抗原性的变化，并可改变转染率和病毒可接受性。

4. 这些“微小盗贼”通过吸取细胞营养，导致细胞生长受阻，形态异常、甚至死亡，严重影响实验结果的可靠性。

预防措施：定期对培养箱、工作台等设备进行消毒。选择经过严格检测的培养基和血清。减少血清的冻融次数，及时更换培养液并保持培养环境的清洁，严格遵守无菌操作规程，避免交叉污染。

抗生素：细胞培养中使用的大多数常规抗生素对支原体无效。硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和酒石酸泰乐菌素在一定程度上是有效的，但可能只是抑制性的，而不是杀支原体的。

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